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考慮到DMSO這類有機(jī)物的細(xì)胞毒性，建議終濃度不超過0.1%（v/v）。

決定類器官形態(tài)的因素有很多，樣本來源是否相同、選用的細(xì)胞因子品質(zhì)是否有差異都有可能改變最終的類器官形態(tài)。對(duì)于類器官的鑒定，我們不能局限于形態(tài)觀察，需要使用多種方法相結(jié)合。

可以使用 2%濃度的多聚.甲.醛進(jìn)行固定。為避免固定后出現(xiàn)解聚的情況，可以加入 1%濃度的戊.二.醛。戊.二.醛作為固定劑，常用于電鏡觀察。如果用戶需要進(jìn)行免疫熒光檢驗(yàn)，加入戊.二.醛后，會(huì)出現(xiàn)明顯的背景熒光。為了解決這一問題，我們建議用戶在固定之后，使用 NaBH4 進(jìn)行淬滅。NaBH4 極易氣泡，進(jìn)行該步驟時(shí)，必須在水平操作臺(tái)上小心操作，避免晃動(dòng)，盡量減少氣泡的形成。另外，用戶也可以嘗試使用較低濃度的戊.二.醛進(jìn)行固定，如 0.1%到 0.5%，濃度越低，背景熒光信號(hào)越少。

低葡聚糖 DMEM 1g/L，其中包含 50 μg/mL 慶大霉素。

首先需要檢查細(xì)胞的接種濃度是否過高，ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)的用量應(yīng)等同于細(xì)胞培養(yǎng)體系中培養(yǎng)基的用量。如果ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)被稀釋到過低的濃度，形成的膠體容易從組織培養(yǎng)器皿表面分離。

ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)是一種從小鼠骨肉瘤中提取的重組基底膜， 新鮮提取的原料中主要包括以下成分：層粘連蛋白，IV型膠原, 巢蛋白，基底膜聚糖、表皮生長(zhǎng)因子、類胰島素生長(zhǎng)因子及其他生長(zhǎng)因子。這些蛋白構(gòu)成了 ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)。在22℃-37℃溫度條件下，大分子間的共價(jià)鍵可以結(jié)合，促使 ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)形成凝膠。而在低溫條件（如4℃）下，由于沒有足夠的能量促使共價(jià)鍵結(jié)合，所以 ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)呈現(xiàn)液體狀態(tài)。

推薦使用預(yù)冷的移液器或者注射器操作，移液管、槍頭同樣需要預(yù)冷。吸液時(shí)不要觸及瓶子底部；分液時(shí)切忌過快、用力過猛。如果使用移液管（Pipets），需要分液5mL時(shí)，應(yīng)該吸取6mL，分液到移液管內(nèi)仍有1mL時(shí)即停止；如果使用自動(dòng)移液器（Pipetman），按壓到第二檔位吸液，然后按壓到第一檔位進(jìn)行分液。

不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康男枰煌?ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)濃度，用戶應(yīng)該根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求確定。ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)最低成膠濃度為 3 mg/mL。稀釋時(shí)不要簡(jiǎn)單進(jìn)行體積倍比稀釋，不同批次間的 ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)濃度有差異，應(yīng)該根據(jù)最終工作濃度 mg/mL算出需要加入的稀釋液體（如PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基）的量。用于體內(nèi)研究的 ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)，為了避免成膠不完全，最終工作濃度不應(yīng)低于 4 mg/mL。

基質(zhì)膠的蛋白濃度越高，膠體越粘稠。如果濃度高于13.0 mg/mL，基質(zhì)膠會(huì)顯得非常厚重。ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)基質(zhì)膠產(chǎn)品在未稀釋前都會(huì)比較粘稠。粘稠的高濃度ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì) HC不稀釋也可以直接使用，如用于培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞和/或血管生成因子，注射于小鼠體內(nèi)后，細(xì)胞可以保持原位，便于原位分析和/或以后的切除；或者稀釋后，按照標(biāo)準(zhǔn)濃度的ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)產(chǎn)品使用方法使用，具體稀釋濃度根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求確定。 除因?yàn)楫a(chǎn)品本身濃度高而粘稠外，基質(zhì)膠的狀態(tài)還與運(yùn)輸過程中溫度的變化和儲(chǔ)藏條件有關(guān)。整個(gè)運(yùn)輸過程中必須使用干冰冷藏。如果儲(chǔ)藏ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)的冰箱帶有自動(dòng)除霜功能，冰箱除霜過程中升溫，可能使基質(zhì)膠成膠。所以，切忌將ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)儲(chǔ)藏于此類冰箱中。為保證ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)的使用效果，凍融次數(shù)應(yīng)該盡可能減少。拿到新的ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)后，請(qǐng)按照單次用量進(jìn)行分裝。每次融化操作，ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)都應(yīng)該放置于冰上。如果ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)在成膠狀態(tài)被凍住，再次融化時(shí)將不能成恢復(fù)液體。

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