氣管類器官原代建立時雜細(xì)胞與氣管碎片極多,有什么方法可以將它們除去呢? 可以使用更小孔徑的濾網(wǎng)嗎?
jie***
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時間:2023-04-06
氣管類器官原代建立時不可避免的會有許多的雜細(xì)胞和氣管碎片。若是紅細(xì)胞,種板前在細(xì)胞懸液中加入紅細(xì)胞裂解液后離心,棄上清,即可除去。而氣管碎片則在類器官傳代時便可去除。不建議用更小孔徑的濾網(wǎng)過濾細(xì)胞懸液,過小的濾網(wǎng)孔徑在阻擋雜細(xì)胞與氣管碎片時也會阻擋目標(biāo)細(xì)胞團。進行種板的細(xì)胞若是太小或是為單細(xì)胞,則類器官成活率低、生長慢。據(jù)過往實驗培養(yǎng)效果,100um為該步驟濾網(wǎng)最佳孔徑。